離子交換層析柱作為生物制藥、蛋白質(zhì)純化及實(shí)驗(yàn)室分離純化的核心工具,其性能直接決定目標(biāo)分子的回收率、純度與實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。然而,填料老化、柱床塌陷、流路堵塞等問(wèn)題常因維護(hù)不當(dāng)而提前出現(xiàn)。尤其對(duì)于價(jià)格昂貴的預(yù)裝柱或自制柱,建立科學(xué)、系統(tǒng)的定期保養(yǎng)機(jī)制,是延長(zhǎng)
離子交換層析柱使用壽命、保障分離效果的關(guān)鍵。

一、每次使用后:即時(shí)清洗與保存
沖洗殘留樣品與緩沖鹽:先用5–10柱體積(CV)的去離子水洗去鹽分,再用20%乙醇或20mMNaOH(根據(jù)填料耐受性)沖洗,殺滅微生物并去除疏水性污染物;
正確保存介質(zhì):強(qiáng)陰/陽(yáng)離子交換填料通常保存于20%乙醇+0.02%防腐溶液中,4℃避光存放;切勿長(zhǎng)期置于高鹽或純水中,以防填料收縮或滋生細(xì)菌;
密封柱兩端接頭,防止干裂或污染。
二、每周維護(hù):流路清潔與密封檢查
檢查柱體接頭、篩板是否滲漏或松動(dòng);
若用于復(fù)雜樣品(如細(xì)胞裂解液),建議每周用0.5–1.0MNaOH反向沖洗1–2CV(確認(rèn)填料兼容),清除內(nèi)毒素與蛋白沉積;
觀察柱壓是否異常升高,初步判斷篩板是否堵塞。
三、每月保養(yǎng):柱效驗(yàn)證與床層評(píng)估
進(jìn)行柱效測(cè)試:使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白(如細(xì)胞色素C、溶菌酶)或小分子(如丙酮)測(cè)定理論塔板數(shù)(N)和不對(duì)稱(chēng)因子(As)。若N下降>20%或As>1.5,提示柱床不均或填料劣化;
檢查柱床是否出現(xiàn)裂縫、氣泡或沉降空隙——輕敲柱體觀察液面是否波動(dòng),必要時(shí)重新勻漿裝柱(僅適用于自制柱)。
四、每季度:深度再生與系統(tǒng)兼容性檢查
執(zhí)行完整再生程序:依次用高鹽(1–2MNaCl)、NaOH、水、保存液沖洗;
檢查連接管路是否老化、接頭是否磨損,避免引入顆粒堵塞篩板;
核對(duì)填料說(shuō)明書(shū),確認(rèn)當(dāng)前使用pH、溫度、溶劑是否在耐受范圍內(nèi)。